Bộ phim chuyển thể mang tên Suicide Squad là lần đầu tiên một nhóm nhân vật phản diện giữ kép chính, thay vì các siêu anh hùng. Phiên bản màn ảnh của Biệt đội tự sát gồm 9 thành viên Slipknot (Adam Beach), Captain Boomerang (Jai Courtney), Enchantress (Cara Delevingne), Katana (Karen Fukuhara), Rick Flagg (Joel Kinnaman), Harley Quinn (Margot Robbie), Deadshot (Will Smith), Killer Croc (Adewale Akinnuoye-Agbaje) và El Diablo (Jay Hernandez).

Song, một ác nhân quan trọng là Joker (Jared Leto) lại không xuất hiện trong bức hình mới của David Ayer. Trước đó, vị đạo diễn tung ra tạo hình riêng của nhân vật và gây bão trên các mạng xã hội hồi tuần trước. Suicide Squad dự kiến khởi chiếu từ 5/8/2016.

Slipknot (Adam Beach): Nhân vật được nhận ra nhờ cuộn dây đeo bên hông. Trong nguyên tác, Slipknot là nhà hóa học phát minh ra loại dây có chất kết dính cực cao, có khả năng trói cứng đối phương. Khác với bộ trang phục “trơn tru” ở truyện tranh, Slipknot trong Suicide Squad có tạo hình hiện đại và phức tạp hơn với nhiều sợi dây, móc nối và vũ khí. Đây là điều hợp lý bởi nếu chỉ chiến đấu bằng một sợi dây thì nhân vật sẽ rất đơn điệu.

Captain Boomerang (Jai Courtney): Điểm đặc biệt của nhân vật là chiếc mũ đội trên đầu. Khi lên phim, Jai Courtney đội mũ lệch, để lộ chỏm tóc và vầng trán. Đây là sự thay đổi nhỏ nhưng được đánh giá cao về mặt thẩm mỹ. Giống như biệt danh, hắn chuyên sử dụng boomerang để chiến đấu.

Enchantress (Cara Delevingne): Từ khi biết tin “ngọc nữ" làng thời trang cũng góp mặt trong Suicide Squad, người hâm mộ chờ mong được thấy tạo hình của cô trong vai phù thủy Enchantress. Tuy nhiên, khi hình ảnh chính thức tung ra, không ít người cảm thấy thất vọng vì bộ dạng nhếch nhác, khiến họ liên tưởng tới nữ thần biển Calypso trong loạt Cướp biển vùng Caribbean. Thay vì màu xanh lá đặc trưng, Delevingne mặc bộ đồ xám xịt với nhiều móc xích, cùng chiếc vương miện hình vầng trăng trên đầu và làm gợi nhớ tới tên thật của Enchantress là June Moone.

Katana (Karen Fukuhara): Trái ngược Enchantress, nhân vật Katana lại giống như bước ra từ các trang truyện. Cô mang mặt nạ Kabuki với dấu hiệu quốc kỳ Nhật Bản trên trán, mặc phục trang cách điệu từ bộ đồ samurai cổ điển và đeo hai thanh kiếm Nhật bên hông. Katana là nữ kiếm sĩ tài ba, có khả năng cận chiến rất tốt. Một thanh kiếm của cô mang tên Soultaker, sở hữu khả năng cầm giữ linh hồn những người bị nó sát hại.

Rick Flag (Joel Kinnaman): Đây là người tỏ ra “nghiêm túc” nhất trong đội hình Biệt đội tự sát. Bộ đồ lính đặc trưng nhưng hơi lôi thôi cho thấy gã không còn là một quân nhân đúng nghĩa. Rick Flag có sự nghiệp chinh chiến lẫy lừng và khi rời khỏi quân ngũ, gã trở thành người nắm quyền lãnh đạo Suicide Squad.

Harley Quinn (Margot Robbie): Nhân vật là “bóng hồng” mật thiết của Joker, gây ấn tượng bởi vẻ ngoài xinh đẹp và tính cách điên khùng không kém gì Hoàng tử hề. Song, tạo hình của Harley Quinn trên màn ảnh rõ ràng được lấy cảm hứng từ trò chơi Arkham Asylum thay vì truyện tranh: kiểu tóc buộc hai bên được nhuộm hồng-xanh, áo trắng thủng lỗ chỗ, quần ngắn bó sát gợi cảm... Do Harley Quinn có nhiều phiên bản khác nhau nên nhân vật của Margot Robbie hiện gây ra không ít tranh cãi.

Deadshot (Will Smith): Deadshot là tên sát thủ có khả năng sử dụng thành thạo nhiều loại vũ khí với tài thiện xạ “bách phát bách trúng”. Đặt chân tới Gotham, hắn ban đầu tham gia chiến đấu chống tội phạm, nhưng rồi nảy sinh ý đồ hạ bệ Batman và trở thành vua thế giới ngầm. Ở series truyền hình Arrow, Deadshot là người da trắng. Tới Suicide Squad, nhân vật do tài tử Will Smith thủ vai.

Killer Croc (Adewale Akinnuoye-Agbaje): Dù sở hữu thân hình to cao với lớp vảy dữ tợn trên mặt, Killer Croc của Suicide Squad vẫn bị đánh giá là còn khá “hiền” so với nguyên tác. Gã sinh ra với hình dạng gần giống bò sát do ảnh hưởng của quá trình tiến hóa ngược hiếm thấy. Với thể chất mạnh mẽ, Killer Croc có thể nâng trọng lượng lên tới 20 tấn. Súng đạn cũng không thể khiến làn da của hắn bị tổn thương.

El Diablo (Jay Hernandez): Diablo trong Suicide Squad là Chato Santana, người kế thừa quyền năng của quỷ El Diablo sau khi Lazarus Lane qua đời. Nhân vật gây ấn tượng qua nhiều hình xăm trên mặt, cái đầu trọc lốc dữ dằn và chiếc áo bóng chày có in tên biệt danh.